1 成像通道数 4个可见光荧光通道(其中1个可改为散射光通道)
2 激光扫描头 共振-非共振(检流计振镜)混合扫描器,前者用于 X 轴扫描(共振频率 8 kHz),后者用于 Y 轴扫描。
3 扫描速度和扫描模式 512 × 512 像素 (30 fps), 512 × 32 像素 (400 fps);扫描模式:XT, XZ, XY, XZT, XYT, XYZ
4 Z 轴步进 压电位移台 Z 轴位移,位移距离 100 μm,步距精度 1 nm。
5 缩放模式 1倍到 8倍之间连续可调
6 独立光阱数目、光阱类型、光阱移动特性 独立光阱数目2个;光阱类型包括主动操纵和被动操纵;光阱移动特性:两个光阱在X和Y方向均能移动
7 光阱工作(移动)范围 50 μm×50 μm×20 μm (X, Y, Z)
8 力学稳定性 ≤ 1.0 pN/min
9 力学分辨率 < 0.2 pN @100 Hz, 2 μm 聚苯乙烯微球
10 光阱拐角频率 0.1-15 kHz
11 最小步移 0.2 nm
12 距离分辨率 0.5 nm @100 Hz
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软件
(1)多通道信号成像和图像处理:包括成像通道的设定、缩放模式(Zoom)的设定和自动图像采集。
(2)光镊操纵和数据处理:包括激光的能量调节、激光安全闸的控制、激光扫描和偏转、激光功率谱的拟合和拐角频率的计算、光阱刚度的计算、光阱力的计算、捕获颗粒位移的计算、光镊参数的校正等
(1)近红外连续激光器,波长1064 nm,功率 5W。
(2)三波长合束激光器(488/561/642 nm), 单波长功率100 mW。
(3)紫外激光器(405 nm),功率 100 mW。
(4)四通道光电倍增管检测器(用于荧光成像)。
(5)双通道四象限光电二极管检测器(用于微粒的位置检测)。
本仪器的全称为“用于活细胞内单颗粒示踪和操纵的光镊显微镜”,通过将近红外光镊捕获技术与共聚焦成像相结合,用于观察和实时操纵单细胞内外的微粒(粒径50 纳米 – 5 微米)。对于细胞内的单颗粒捕获和操纵,主要对象涉及细胞内的脂滴和多种细胞器等,以及侵入细胞的外来粒子如病毒颗粒等,结合主动-被动校正方法与微流变学中热波动拟合方法,可以测定细胞内局域在低频和高频范围内的粘弹性模量的微小变化,还可以研究颗粒运动的力学机制(马达蛋白的力学行为); 对于细胞外的单颗粒光镊捕获,一般以大尺寸颗粒(如3 μm的PS微球)作为力学探针对细胞施加pN级力(包括挤压力和牵引力)的作用,用于表征细胞膜张力和粘弹性的微小改变,考察细胞外基质(ECM)的改变对细胞机械性质的影响,研究单细胞力学传导机制等问题。该仪器具备较高的时间和空间分辨率,可在0-100 pN通道激活区间完成无损单细胞、亚细胞精准力学刺激,规避传统设备带来的非特异性损伤。
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